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荧光定量PCR仪器的耗材更换周期并非固定不变,会受到多种因素影响,以下为你详细介绍常见耗材的更换周期及相关要点:
反应管
更换周期:通常在使用1 - 2次后建议更换。
影响因素
材质特性:反应管一般有塑料材质等,在PCR反应的高温变性阶段(常达95℃左右),塑料材质会逐渐发生热降解,多次使用后可能出现变形、破裂等情况,影响反应体系的密封性,导致液体蒸发或外界污染进入,从而影响检测结果。
样本污染风险:每次使用后,反应管内壁可能残留样本核酸、蛋白质等物质,即使经过清洗,也难以去除。这些残留物可能会对后续实验产生交叉污染,干扰检测结果的准确性。
密封垫或密封膜
更换周期:一般使用1次后即需更换。
影响因素
密封性能:密封垫或密封膜的主要作用是保证反应管在PCR反应过程中的密封性,防止液体蒸发和外界污染。在一次PCR反应中,密封垫或密封膜会受到高温和压力的作用,其密封性能会逐渐下降。如果重复使用,可能会导致密封不严,影响反应的稳定性和准确性。
材质老化:密封材料在高温环境下容易老化变硬,失去弹性,无法紧密贴合反应管,从而影响密封效果。
移液器枪头
更换周期:每吸取一个样本或试剂后都应更换。
影响因素
避免交叉污染:在荧光定量PCR实验中,样本和试剂的纯度和准确性至关重要。使用一次性移液器枪头可以有效避免不同样本或试剂之间的交叉污染,保证实验结果的可靠性。如果重复使用枪头,可能会导致样本或试剂的残留,影响后续实验的结果。
保证吸液精度:多次使用后,枪头内壁可能会残留液体,影响吸液的精度和准确性,进而影响PCR反应体系中各组分的比例,对实验结果产生不利影响。
滤芯吸头(若使用)
更换周期:同样需每吸取一个样本或试剂后更换。
影响因素
过滤功能:滤芯吸头内置的滤芯可以过滤掉样本或试剂中的颗粒物、气溶胶等污染物,保护移液器和实验环境。一旦使用过,滤芯就可能被污染,失去过滤效果,如果继续使用,可能会将污染物带入新的样本或试剂中,影响实验结果。
防止交叉污染:与普通移液器枪头一样,滤芯吸头重复使用也会增加交叉污染的风险,因此必须一次一换。
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