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明确样本类型与采集时机
样本类型选择
猪瘟PCR抗体检测主要采集血液样本,一般选择前腔静脉采血或耳静脉采血。前腔静脉采血时,将猪保定好,在猪颈部腹侧,第一、二肋骨与胸骨柄结合处前方的凹陷处进针,针头朝向对侧肩关节方向刺入,见有回血即可采集血液。耳静脉采血则相对简单,拉住猪耳,使耳静脉怒张,用针头平行刺入耳静脉,采集血液。
除了血液,也可采集唾液样本,但唾液中抗体含量相对较低,检测难度较大。采集唾液时,可使用棉绳或专用唾液采集器,将棉绳挂在猪栏上,让猪啃咬,待棉绳湿润后取下,挤出唾液到无菌容器中。
采集时机把握
应在猪感染猪瘟病毒后的一定时间采集样本,此时抗体水平较高,检测准确性更高。一般来说,猪感染猪瘟病毒后7 - 10天开始产生抗体,2 - 3周抗体水平达到高峰。因此,最好在猪出现疑似猪瘟症状后的2 - 3周采集样本进行检测。
做好采集前准备工作
器材准备
准备一次性无菌采血针、真空采血管、棉球、碘伏、止血带、无菌容器等器材。采血针和真空采血管要确保在有效期内且包装完好,避免使用过期或破损的器材。
对于唾液采集,要准备好棉绳或专用唾液采集器,并确保其清洁无菌。
猪只保定
采血前要对猪只进行保定,防止猪只乱动导致采血失败或人员受伤。可以使用保定架或绳索将猪只固定好,使其头部和身体不能随意晃动。保定过程中要注意动作轻柔,避免对猪只造成不必要的应激。
规范采集操作流程
采血操作规范
采血部位要严格消毒,先用碘伏棉球由内向外螺旋式消毒采血部位,消毒范围直径不小于5厘米,待碘伏干燥后再进行采血。采血时,针头要快速刺入血管,避免反复穿刺,以免引起溶血或组织液混入血液,影响检测结果。
采集血液时,要根据检测需求控制采血量,一般采集3 - 5毫升即可。采血完成后,用棉球按压采血部位,防止血液渗出。
唾液采集操作规范
唾液采集前要让猪只禁食一段时间,一般禁食2 - 3小时,以减少食物残渣对唾液的影响。采集过程中,要确保棉绳或采集器不被污染,避免引入其他病原体或杂质。采集到的唾液要及时转移到无菌容器中,并尽快送检。
样本保存与运输注意事项
样本保存
采集到的血液样本应尽快离心分离血清,将血清转移到新的无菌离心管中,密封保存。如果不能及时检测,可将血清置于2 - 8℃冰箱中短期保存(不超过3天),长期保存应置于-20℃或-80℃冰箱中。
唾液样本采集后应立即冷藏保存,在2 - 8℃条件下可保存24 - 48小时,如需长期保存,也应置于-20℃或-80℃冰箱中。
样本运输
样本运输过程中要使用冷藏箱或冰袋,保持样本的低温状态。运输时间不宜过长,尽量在24小时内将样本送达检测实验室。同时,要做好样本的标识和记录,包括样本编号、猪只信息、采集时间等,以便检测人员准确识别和处理。
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