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非洲猪瘟检测仪器清单的操作流程有哪些关键步骤?

更新时间:2025-06-20      点击次数:24

  【BK-PCR16D】山东博科仪器以客户为中心,以服务为宗旨,以创新为动力。 样本采集与处理

  样本采集

  根据检测目的选择合适的样本类型,如血液、组织、唾液、鼻腔拭子等。采集血液时,一般选择前腔静脉或耳静脉,使用一次性无菌注射器抽取适量血液,注入含有抗凝剂的采血管中,轻轻颠倒混匀,防止血液凝固。采集组织样本时,选取病变明显的部位,如淋巴结、脾脏等,用无菌器械切取适量组织,放入无菌容器中。采集唾液和鼻腔拭子时,使用专用的采样拭子,在猪口腔或鼻腔内轻轻旋转擦拭,然后将拭子放入保存液中。

  样本处理

  对于核酸检测,需对样本进行核酸提取。将采集的样本按照核酸提取试剂盒的说明书进行操作,通常包括样本裂解、核酸结合、洗涤和洗脱等步骤。例如,将血液样本离心,取上清液加入裂解液中,充分混匀后进行高温裂解,然后加入磁珠结合核酸,经过多次洗涤去除杂质,最后用洗脱液将核酸洗脱下来。对于抗原检测,一般需要对样本进行适当稀释,以减少样本中杂质对检测结果的干扰。

  仪器准备与调试

  仪器安装

  按照仪器说明书的要求,将非洲猪瘟检测仪器放置在平稳、干燥、通风良好的工作台上,连接好电源线和数据线。确保仪器周围有足够的空间,便于操作和维护。

  仪器调试

  打开仪器电源,进行预热和自检。根据仪器提示,进行参数设置,如检测模式、检测通道、反应温度和时间等。例如,在核酸检测仪器中,设置PCR反应的温度循环参数,包括变性温度、退火温度和延伸温度以及各阶段的时间。对仪器进行校准,使用标准品或质控品进行检测,确保仪器的检测结果准确可靠。

  试剂准备与加样

  试剂准备

  检查试剂的有效期、外观和保存条件。按照试剂说明书的要求,将试剂从冰箱中取出,放置至室温平衡。将检测试剂从试剂瓶中取出,按照规定的比例进行稀释或混合。例如,将酶标试剂与稀释液按照一定比例混合,充分混匀后备用。

  加样操作

  使用移液器准确吸取样本和试剂,加入到检测板或反应管中。加样时要注意避免产生气泡,确保加样量准确。例如,在酶联免疫吸附试验(ELISA)中,将处理好的样本和阴性、阳性对照品分别加入到酶标板的孔中,每孔加入量一般为100μL。加样完成后,轻轻晃动检测板或反应管,使样本和试剂充分混合。

  检测过程与监控

  启动检测

  将加好样的检测板或反应管放入检测仪器中,关闭仪器门,启动检测程序。仪器会自动按照设定的参数进行检测,如PCR扩增、抗原抗体反应等。

  实时监控

  在检测过程中,密切关注仪器的运行状态和检测数据。如发现仪器出现异常情况,如温度异常、噪音过大等,应立即停止检测,排查故障原因。对于一些需要实时观察的检测项目,如荧光定量PCR检测,可以通过仪器显示屏观察扩增曲线,判断检测是否正常进行。

  结果判读与记录

  结果判读

  检测完成后,仪器会自动生成检测结果。根据检测方法和试剂说明书的要求,对检测结果进行判读。例如,在核酸检测中,根据Ct值(循环阈值)判断样本是否为阳性,一般Ct值小于规定阈值的样本为阳性;在抗原检测中,根据显色反应判断结果,出现明显显色的样本为阳性。对于一些可疑结果,应进行重复检测或采用其他检测方法进行验证。

  结果记录

  将检测结果准确记录在检测记录表中,包括样本编号、检测时间、检测方法、检测结果等信息。同时,对检测过程中出现的异常情况进行详细记录,以便后续分析和追溯。


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