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松材线虫病可随疫木、枝桠、木质包装跨区域传播,疫木检疫是阻断病害扩散的关键关口。传统疫木检疫依靠人工外观检查结合实验室镜检,存在检出慢、隐性感染难以识别等短板。松材线虫 DNA 检测仪作为疫木现场检疫新工具,将分子检测技术应用于木材抽检环节,实现疫木现场快速甄别,为疫木监管提供技术支撑。
开展疫木检疫实操检测,第一步为样本采集。在疫木堆场、木材调运卡口等检疫现场,选取待检松木边材部位,避开树皮腐朽区域,采集木屑样本。针对整批疫木,按照检疫抽样规范多点取样,混合制样,提升检出概率,同步登记木材来源、树种、采样点位等信息,保证样本信息可追溯。取样完成后做好样本密封存放,防止交叉污染。
第二步是样本前处理操作。将采集的木屑样本放入裂解管,加入配套裂解试剂,经过震荡、静置完成细胞裂解,释放样本内的松材线虫 DNA。该前处理方案简化了纯化步骤,无需离心机等大型设备,适配检疫现场条件。操作过程中一次性耗材单独使用,待测样本与阳性对照分开处理,避免核酸气溶胶污染造成假阳性结果。

第三步上机检测与信号采集。将处理好的反应体系加入检测模块,启动仪器程序。设备依托等温扩增技术,在恒定温度下完成靶标 DNA 扩增,光学传感器自动采集荧光信号,内置算法实时记录扩增曲线,20 至 30 分钟完成整套检测。操作人员只需观察仪器自动输出结果,降低人工判读带来的主观误差。
第四步结果判定与处置。仪器判定阳性,说明样本检出松材线虫,该批次疫木按检疫规定处置;阴性结果代表本次样本未检出目标核酸;出现临界可疑信号的样本,单独留存,送至实验室复核。现场检测作为初筛手段,不可直接替代实验室鉴定结果,形成 “现场初筛 + 实验室复核" 的检疫工作机制。
实操环节也需要留意设备与环境管控。野外检疫环境温差较大,避免强光直射仪器;作业前完成设备自检,定期校准温控与光学模块;检测结束及时清洁检测腔,清理试剂残留。试剂按储存条件保管,防止失效影响检测效果。
综上,松材线虫 DNA 检测仪简化疫木检疫检测流程,解决传统检疫送检周期长的痛点,在疫木调运、堆场检疫、疫木处置核查场景具备良好实用性。规范采样、前处理、上机判读全流程操作,能够充分发挥设备效能,提升疫木检疫的精准度与时效性,筑牢松材线虫病源头管控防线。
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